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1、克隆技术克隆技术无性生殖无性生殖1、概念、概念受精卵受精卵生殖细胞生殖细胞体细胞体细胞：植物体的每个活细胞具有遗传上的植物体的每个活细胞具有遗传上的全能性全能性, ,都具有发育为完整植株的潜都具有发育为完整植株的潜能，叫做植物细胞全能性。能，叫做植物细胞全能性。2、原因、原因3、全能性的体现：、全能性的体现： ：从理论上讲，每个细胞都包含该物种从理论上讲，每个细胞都包含该物种的全部遗传物质（全部基因），所以每的全部遗传物质（全部基因），所以每个活细胞都应具有全能性个活细胞都应具有全能性 。一、植物细胞的全能性一、植物细胞的全能性植物细胞植物细胞 动物细胞动物细胞不同种类植物或同种植物的不同基因
2、型个体之间不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间因遗传性的差异因遗传性的差异, ,细胞全能性的表达程度大不相同细胞全能性的表达程度大不相同. .有些植物在多次继代培养后，会丧失细胞全有些植物在多次继代培养后，会丧失细胞全能性的表达能力能性的表达能力 原因：原因：1.1.遗传物质发生不可逆转的改变遗传物质发生不可逆转的改变 2.2.激素平衡被打破或外源激素作用的结果激素平衡被打破或外源激素作用的结果克隆成功所需的条件克隆成功所需的条件（a a）1.1.探讨特定植物细胞全能性表达的探讨特定植物细胞全能性表达的条件条件( (激素配比激素配比) )2.2.选择性能优良、细胞全能型表达充分的基因型选
3、择性能优良、细胞全能型表达充分的基因型 思考讨论：为什么体内细胞没有表现出思考讨论：为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 基因在特定空间和时间条件下基因在特定空间和时间条件下选择性表达选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同生物体不同部位的细胞部位的细胞表达的基因是不同的，表达的基因是不同的，合成的合成的蛋白蛋白质质也不一样也不一样，从而形成了从而形成了不同的组织和器官。不同的组织和器官。离体离体组织或器官，组织或器官，无菌无菌二、植物组织培养程序二、植物组织培养程序1 1、配置配置半固体培
4、养基半固体培养基2 2、无菌操作无菌操作从根茎叶从根茎叶等切取一些小块组织等切取一些小块组织3 3、获得、获得愈伤组织愈伤组织4 4、诱导愈伤组织、诱导愈伤组织5 5、再生新植株出现、再生新植株出现脱分化（激素）脱分化（激素）通过调节通过调节营养物质和生长调节营养物质和生长调节剂剂的适当配比（的适当配比（再分化再分化）植物组织培养的培养基植物组织培养的培养基 无机营养成分：植物所必需的大量元素及微量无机营养成分：植物所必需的大量元素及微量元素元素 有机营养成分有机营养成分 含含N N物质：包括维生素和氨基酸物质：包括维生素和氨基酸 碳源：碳源：2%2%5%5%的的蔗糖蔗糖 琼脂：起凝固支持作用
5、琼脂：起凝固支持作用生长调节剂生长调节剂：（：（生长素，细胞分裂素）生长素，细胞分裂素）PHPH值：值：5.05.06.06.0蔗糖比葡萄糖便宜蔗糖比葡萄糖便宜植物体内有蔗糖转化酶，可以吸收和利用蔗糖；植物体内有蔗糖转化酶，可以吸收和利用蔗糖；无菌培养无菌培养愈伤组织愈伤组织愈伤组织：愈伤组织：植物组织块切口处的细胞在创伤的植物组织块切口处的细胞在创伤的刺激下发生刺激下发生脱分化脱分化，继续分裂增殖，继续分裂增殖，形成一种相对没有分化的形成一种相对没有分化的活的薄壁活的薄壁细胞团组成的新生组织。细胞团组成的新生组织。植物细胞的植物细胞的脱分化：（避光）脱分化：（避光）由高度分化的植物由高度分化
6、的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。分化。三、植物细胞培养三、植物细胞培养(克隆克隆)主要几种技术：主要几种技术：1 1、植物组织培养、植物组织培养 克隆技术的基础克隆技术的基础2 2、悬浮细胞培养悬浮细胞培养（形成人工种子）（形成人工种子）通过通过液体悬浮培养液体悬浮培养使愈伤组织分散成使愈伤组织分散成单细胞单细胞，经适宜培养基中成，经适宜培养基中成分的诱导，可发育成胚状体，从而形成新株。分的诱导，可发育成胚状体，从而形成新株。3.3.器官培养器官培养指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体
7、的离体无菌培养。体的离体无菌培养。指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。指以单个游离细胞为外植体的离体无菌培养。 4.4.细胞培养细胞培养5.5.原生质体培养与植物细胞工程原生质体培养与植物细胞工程指以原生质体为外植体的离体无菌指以原生质体为外植体的离体无菌培养培养。 外植体外植体 原生质体融合技术原生质体融合技术这幅番茄这幅番茄马铃薯图利用传统有性杂交马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？方法能实现吗？为什么？科学家的幻想：让一株植株地上部分结科学家的幻想：让一株植株地上部分结番茄，地下部分长土豆。这个幻想可能番茄，地下部分长土豆。这个幻想可能实现吗？实现吗？杂杂种种植植株株融合的融合的原生质原生质体体ABAB再再生生出出细细胞胞壁壁脱脱分分化化愈愈伤伤组组织织再再分分化化原生质体的融合原生质体的融合植物组织培养植物组织培养植物细胞植物细胞A原生质体原生质体B原生质体原生质体A杂种杂种细胞细胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工诱诱导导方法？方法？促进融合促进融合的方法？的方法？融合融合完成完成的的标志标志植物细胞植物细胞B植物体细胞杂交技术过程植物体细胞杂交技术过程