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1、细菌病的实验室诊断方法 学习目标 ?知识目标 ?掌握细菌病实验室诊断的方法 ?理解利用各种诊断方法的进行鉴定的意义 ?能力目标 ?具备结合临床病例设计实验室诊断方案的能力 主要内容 ?病料的采集、保存和运送 ?细菌的形态学检查 ?细菌的分离培养 ?生化试验 ?动物接种 ?血清学试验 ?分子生物学技术 重点与难点 ?重点 ?细菌病实验室诊断的方法 ?难点 ?设计实验方案 细菌病的实验室诊断 初诊：根据流行病学、症状、病变等方面的疾病特征，做出初步诊断 通过实验室诊断，确定病原是否是细菌以及病原菌的类型 实验室诊断是在临床诊断的基础上进行的 细菌病实验室诊断方法 ?病料的采集、保存和运送 ?细菌的
2、形态学检查 ?细菌的分离培养 ?生化试验 ?动物接种 ?血清学试验 ?分子生物学技术 病料的采集、保存和运送 ?病料采集遵循的原则 ?防止污染 无菌采样 适时采样 适当部位 ?病料采集方法（不同病料不同方法） ?实质脏器 液体材料 其他病料 ?病料的保存和送检 细菌性病料的保存和送检 ?低温保存 ?尽快送检 ?做好记录 ?畜主姓名、动物种类、地址、发病情况、欲检部位及检验项目、采集时间等 细菌的形态学检查 ?方法 ?光学显微镜检查 ?电子显微镜检查 ?意义 ?观察病料中有无细菌以及细菌的形态、数量、分布、结构、种类等，进行初步判断 细菌的分离培养 ?方法：用分区划线法在合适培养基上培养 ?意义
3、 ?看培养基中有无细菌生长推断是否为细菌病 ?依据菌落的特征判断细菌种类 ?用菌落中的细菌进一步作形态学鉴定 ?可进一步作生化鉴定、血清学鉴定及动物试验 ?可进一步作药敏试验 细菌的生化试验 ?进行生化试验的细菌必须是纯培养物。 ?检验时，根据可疑细菌的生化特性选择特定的一组生化试验，将结果与标准进行对比，以确定病原菌的种类。 ?例：不同种沙门氏菌的生化鉴定 ?意义意义 ?将待检细菌液接种到动物体内，观察动物发病情况，进一步确认可疑细菌的致病作用和类型。 ?接种对象 ?本动物 ?试验动物 ?接种途径 动物接种 血清学试验 ?临床诊断中，可用于细菌的血清分型、快速诊断或大群检疫。 ?用已知抗体检
4、测动物体内的病原菌 ?用已知的病原菌抗原检测动物血清中的抗体 ?例：鸡白痢的检疫 分子生物学方法 ?分子生物学技术对病原菌的快速诊断和不能人工培养的细菌的探索发挥巨大的作用。 ? PCR技术、核酸分子杂交技术等。 大肠杆菌病实验室诊断方案 病料中细菌的形态学检查 病料中细菌的分离培养病料中细菌的分离培养 18小时后小时后 动物致病性试验动物致病性试验 涂片革兰氏染色涂片革兰氏染色 生化试验生化试验 H2S试验试验 糖发酵试验 MR试验试验 10日龄小鸡，皮下注射下注射0.2ml/只只 病料病料 纯培养纯培养 大肠杆菌病实验室诊断结果 ?剖检（采集病料） ?纤维素渗出物的涂片染色 ?分离培养（麦康凯或伊红美蓝琼脂平板） ?培养物涂片革兰氏染色 ?生化试验 ?动物接种试验 谢 谢！